OBJETIVO: Avaliar alterações do endotélio corneano após aplicação de mitomicina C na esclera por meio de microscopia eletrônica de transmissão e de varredura e correlacionar as alterações com tempo, concentração e entre os dois métodos de avaliação. MÉTODOS: Foi avaliado o endotélio corneano dos olhos de 32 coelhos albinos distribuídos em 4 grupos experimentais com 8 coelhos cada um. A mitomicina C foi aplicada sob retalho escleral no olho direito por 5 minutos. Nos grupos G1 e G2 a concentração da mitomicina C foi de 0,5 mg/ml e nos grupos G3 e G4 a concentração foi de 0,2 mg/ml. O exame foi realizado com 15 dias após nos grupos G1 e G3 e com 30 dias nos grupos G2 e G4. Dos 8 animais 4 foram preparados para microscopia eletrônica de transmissão e 4 para microscopia eletrônica de varredura. Os olhos esquerdos de todos animais serviram como controle. RESULTADOS: À microscopia eletrônica de transmissão foram observadas alterações do endotélio corneano em todos os grupos experimentais: rarefação do citoplasma, dilatação e fragmentação das cisternas do retículo endoplasmático rugoso, aparelhos de Golgi com dilatação das cisternas, redução de vacúolos e irregularidades da membrana celular interna sendo mais intensas em G1 e G2. À microscopia eletrônica de varredura foram observadas alterações em todos grupos experimentais, exceto G1: alteração de forma e tamanho das células e projeções filopoidais mais longas. CONCLUSÕES: 1 - A mitomicina C causou alteração no endotélio da córnea tanto na concentração de 0,5 mg/ml como de 0,2 mg/ml observadas 15 e 30 dias após a aplicação; 2 - As alterações foram mais intensas com a maior concentração de mitomicina C (0,5 mg/ml) na microscopia eletrônica de transmissão e não na microscopia eletrônica de varredura; 3 - As alterações tiveram correlação com o tempo na microscopia eletrônica de varredura e não na microscopia eletrônica de transmissão.

PURPOSE: To evaluate corneal endothelium alterations after applying mitomycin C to the sclera using transmission and scanning electron microscopy, correlating alterations with time, concentration, and evaluation methods. METHODS: The corneal endothelium of both eyes of 32 albino rabbits was evaluated and distributed into four groups of 8. Mitomycin C was applied under a scleral flap in the right eye for 5 minutes. Mitomycin C concentrations were 0.5 mg/ml for G1 and G2 and 0.2 mg/ml for G3 and G4. Examinations were performed 15 days after application to G1 and G3, and 30 days after application to G2 and G4. Four cornea in each group were prepared for transmission electron microscopy and four for scanning electron microscopy. Left eyes of all animals were used as controls. RESULTS: Transmission electron microscopy showed corneal endothelium alterations in all groups: rarefied cytoplasm, dilation and fragmentation of rough endoplasmic reticulum cisternae, Golgi apparatus with cisternal dilation, reduced vacuoles, and irregularities of internal membrane more noticeable in G1 and G2. Scanning electron microscopy revealed alterations in all groups except G1: changes in the shape and size of cells and longer filopodial projections. CONCLUSIONS: 1 - Corneal endothelium alterations were seen at both 0.5 and 0.2 mg/ml concentrations and at 15 and 30 days after mytomicin C application; 2 - Alterations were more intense with higher mytomicin C concentration by transmission electron but not by scanning electron microscopy; 3 - The alterations correlated with time by scanning electron microscopy but not by transmission electron microscopy.

Papilomatose laríngea é neoplasia benigna mais freqüente nas crianças, causada pelo HPV, principalmente subtipos 6 e 11 e caracteriza-se pela presença de lesões proliferativas exofíticas e recidivantes sobre a mucosa das vias aérea, em especial na laringe. Forma de Estudo: Clínico prospectivo. OBJETIVOS: Demonstrar alterações epiteliais morfológicas (pela microscopia de luz e eletrônica) em lesões papilíferas casadas pelo HPV-6. MATERIAL E MÉTODOS: Fragmentos de lesões de papilomatose laríngea, colhidos durante procedimento cirúrgico de quatro crianças (1 masculino, 3 femininas), foram submetidos à tipagem do HPV (por método de PCR), análise pela microscopia de luz e microscopia eletrônica (varredura e transmissão). RESULTADOS: Na tipagem, todos os papilomas eram do subtipo 6. A microscopia de varredura identificou projeções epiteliais de vários tamanhos, com células superficiais em descamação. A microscopia de luz demonstrou lesões exofíticas, revestidas por epitélio hiperplásico com coilócitos e binucleações, característicos do HPV. A membrana basal e o córion adjacente estavam íntegros. À microscopia eletrônica de transmissão identificou-se vacuolização perinuclear e alargamento das junções intercelulares. CONCLUSÕES: As alterações morfológicas apresentadas pelo HPV-6 demonstram o caráter não-invasivo da lesão, sendo necessário estudos morfológicos adicionais relacionando os outros tipos de HPV, considerados mais agressivos, com os achados ultra-estruturais.

Laryngeal papillomatosis is the most frequent benign neoplasia in children. It is caused by HPV 6 and 11. The lesions are exophytic and highly recurrent, compromising the airway mucosa, mainly the larynx. Study design - clinical prospective. AIMS: to show morphologic alterations of the epithelium (light and electron microscopy) in the HPV-6 lesions. METHODS: specimens of laryngeal lesions obtained during surgery of four children (1 male, 3 female) were submitted to HPV typing (PCR), light microscopy and electron microscopy. RESULTS: in all specimens, HPV type 6 was found. Epithelial projections were found by electron microscopy with superficial cells in desquamation. Light microscopy showed exophytic projections of the keratinized stratified squamous epithelium overlying a fibrovascular core. Koilocytes (vacuolated cells), suggesting the viral infection by HPV, were identified. No alterations were seen in the basement membrane and corion. Ultraestrutural analysis showed vacuolated cells with clear cytoplasmic inclusions, intercellular injuries and widening intercellular spaces. CONCLUSIONS: morphologic alterations of the epithelium in the HPV-6 lesions are superficial, and additional studies including the others HPV types are needed to show the more aggressive and extensive aspect of the disease.

OBJETIVO: Avaliar o epitélio ciliar interno (ECI) do corpo ciliar após aplicação de mitomicina C (MMC) sob retalho escleral, em animais tratados com dois tipos de inibidores da produção do humor aquoso. MÉTODOS: Foram estudados ambos os olhos de 16 coelhos divididos em 4 grupos experimentais. Foi realizado retalho escleral em todos os olhos dos animais, mas apenas os olhos direitos (OD) receberam MMC. No grupo 1 (G1) não houve tratamento prévio. Nos grupos G2 e G4 foi administrada acetazolamida e nos grupos G3 e G4 maleato de timolol. O ECI foi examinado à microscopia eletrônica de transmissão (MET). Os olhos esquerdos formaram os grupos controle. RESULTADOS: Em todos os grupos exceto no G1 OE, foram observadas: retração das células e/ou alargamento entre invaginações, mitocôndrias com rarefação, vesículas claras e corpos densos. A membrana limitante interna estava espessada, descontínua ou descolada em todos grupos exceto G1 OE e G2 OE. Foi observada liberação de material citoplasmático apenas nos grupos tratados com inibidores da produção de humor aquoso. CONCLUSÕES: 1- MMC, acetazolamida e maleato de timolol causaram alterações morfológicas no epitélio ciliar mesmo usados isoladamente. 2- A associação MMC e acetazolamida causou mais alterações do que a acetazolamida isoladamente, mas não mais do que a MMC isoladamente. 3- Nas demais associações as alterações foram semelhantes.

PURPOSE: To evaluate the effects of mitomycin C (MMC) on the internal ciliary epithelium (ICE) of the ciliary body of animals treated with two differents aqueous humor supressants. METHODS: The eyes of sixteen Norfolk albino rabbits divided into four experimental groups were studied. The right eyes (RE) of the four groups received 0.1 ml of MMC (0.5 mg/ml) under the scleral flap. The left eyes (LE) was the control group. Group 1 (G1) did not have any other treatment. To Group 2 (G2) and Group 4 (G4) acetazolamide was administered. To Group (G3) and Group 4 (G4) timolol maleate was administered. ICE was examined by transmission electron microscopy (TEM). RESULTS: The following aspects were observed in all groups, except in G1 LE: cell shrinkage and/or enlargement of intercellular spaces, rarefied mitochondria, clear vesicular structures and electron-dense bodies. The internal limitant membrane showed to be thickened, discontinued and separeted in all groups, except in G1 LE and G2 LE. Discharge of cytoplasmatic material was observed only in the groups treated with aqueous humor supressants. CONCLUSIONS: 1) MMC, acetazolamide and timolol maleate caused morphological alterations in the ciliary epithelium even when used alone. 2) The combination of MMC and acetazolamide caused more alterations than did isolated acetazolamide, but not more than MMC alone. 3) For the other combinations the alterations were similar.

OBJETIVO: Avaliar o uso do programa AutoCAD 2004 para estudos quantitativos em microscopia eletrônica. MÉTODOS: A demonstração da utilização do AutoCAD 2004 foi feita em um modelo experimental de diabetes induzido em ratos, divididos em Grupo Controle (GC-10 animais) e Grupo Diabético (GD - 10 animais), avaliados 1 mês depois da indução do diabetes. Os olhos foram removidos após o sacrifício dos animais e preparados para exame em microscópio eletrônico, tendo sido feitas fotografias dos vasos retinianos. Foi utilizado o programa AutoCAD2004 para avaliar a espessura da membrana basal dos vasos. Os resultados foram avaliados estatisticamente. RESULTADOS: Usando o método proposto foi possível realizar medidas quantitativas na membrana basal de vasos retinianos de ratos diabéticos. CONCLUSÃO: O AutoCAD 2004 se mostrou efetivo, seguro e de fácil utilização para a quantificação de fenômenos biológicos, sendo possível sugerir este meio para a realização de avaliações quantitativas em experimentos biológicos.

OBJECTIVE: To determine if the AutoCAD 2004 program is available to be used in quantitative research on electron microscopy. METHODS: A demonstrative of the AutoCAD2004 was done in an experimental model of diabetes induced in rats. The animals were divided by lot in control group animals (GC-10 animals) and diabetic group (GD - 10 animals), evaluated 1 month after the diabetes induction. The eyes were removed after sacrifice and prepared to electron microscopy. The retina was photographed and the AutoCAD2004 program was used to measure the basal membrane of retina vessels. The results were submitted to statistical analysis. RESULTS: The AutoCAD2004 was effective to obtain quantitative measures from the basal membrane of retina vessels and there were no difference between the studied groups. CONCLUSION: The AutoCAD2004 was effective, safe and easy to apply to quantify biological parameters, which allowed suggest it to quantitative research.

OBJETIVO: Conhecer os efeitos do diabetes e o impacto de seu tratamento medicamentoso em curto e longo prazo sobre os vasos da coróide e membrana de Bruch. MÉTODOS: Foram estudados 30 ratos Wistar, divididos em 3 grupos experimentais: grupo controle (GC), grupo diabético (GD) e grupo diabético tratado (GT), estudados 1 mês (momento M1) e 12 meses (momento M2) após o início do experimento. O diabetes foi induzido por aloxana endovenosa, na dose de 42 mg/kg. O GT foi tratado com hipoglicemiante oral (acarbose) e insulina subcutânea. Após o sacrifício, os olhos foram preparados para exame ao microscópio eletrônico de transmissão, interessando a ultra-estrutura da membrana de Bruch e os vasos da coróide. RESULTADOS: O exame ultra-estrutural da coróide dos ratos diabéticos mostrou depósitos na membrana de Bruch, acúmulo de vesículas, glicogênio e corpos densos no citoplasma das células endoteliais. O grupo mais afetado foi de ratos diabéticos de 12 meses (GDM2). Os animais com menor intensidade de alterações foram os ratos tratados por 12 meses (GTM2). CONCLUSÃO: Os ratos diabéticos desenvolveram alterações degenerativas na membrana de Bruch e vasos da coróide. Estas alterações foram mais evidentes nos animais submetidos à doença crônica, mas também ocorreram agudamente. O tratamento a curto prazo não foi capaz de evitar os processos degenerativos. A longo prazo, o tratamento inibiu a progressão destes processos.

PURPOSE: To evaluate the diabetic alterations and the impact of short and long-term medical treatment on them. METHODS: Thirty Wistar rats were divided into 3 groups: control (GC), diabetic (DG), and treated diabetic (TG) and the observations were made 1 month (M1) and 12 months (M2) after diabetes induction. Diabetes was induced by intravenous alloxan (42 mg/kg). The treated group received acarbose orally and insulin by subcutaneous injection. Eyes were prepared for transmission electron microscopy, specifically for ultrastructure of the Bruch membrane and choroidal vessels. RESULTS: Ultrastructural examination of the diabetic rat coroid showed deposits in the Bruch membrane and accumulation of vesicles, glycogen and dense bodies in endothelial cell cytoplasm. The most affected group was that of the diabetics on month 12 (GDM2). The treated diabetics showed the least alterations on month 12 (GTM2). CONCLUSION: Diabetic rats develop degenerative alterations in the Bruch membrane and choroidal vessels. These alterations are more evident in animals submitted to chronic disease, but they are also present in acute disease. Degenerative processes were not avoided with short-term treatment. Long-term treatment inhibited the progress of these processes.

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: As lesões da mucosa traqueal em contato com o balonete do tubo traqueal são proporcionais à pressão exercida pelo balonete e ao tempo de exposição. O objetivo foi estudar as eventuais lesões da mucosa do segmento traqueal em contato com o balonete do tubo traqueal insuflado com volume de ar suficiente para se obter pressão de “selo” ou com a pressão limite de 25 cmH2O, abaixo da pressão crítica de 30 cm de água para produção de lesão da mucosa traqueal. MÉTODO: Dezesseis cães foram submetidos à anestesia venosa e ventilação artificial. Os cães foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos de acordo com a pressão no balonete do tubo traqueal (Portex Blue-Line, Inglaterra): Gselo (n = 8) balonete com pressão mínima de “selo” para impedir vazamento de ar durante a respiração artificial; G25 (n = 8) balonete insuflado até obtenção da pressão de 25 cmH2O. A medida da pressão do balonete foi realizada por meio de manômetro digital no início (controle) e após 60, 120 e 180 minutos. Após o sacrifício dos cães, foram feitas biópsias nas áreas da mucosa traqueal adjacentes ao balonete e ao tubo traqueal para análise à microscopia eletrônica de varredura (MEV). RESULTADOS: A pressão média do balonete em G25 manteve-se entre 24,8 e 25 cmH2O e em Gselo entre 11,9 e 12,5 cmH2O durante o experimento. As alterações à MEV foram pequenas e não significantemente diferentes nos grupos (p > 0,30), mas ocorreram lesões mais intensas nas áreas de contato da mucosa traqueal com o balonete do tubo traqueal, nos dois grupos, em relação às áreas da mucosa adjacentes ou não ao tubo traqueal (p < 0,05). CONCLUSÕES: No cão, nas condições experimentais empregadas, a insuflação do balonete de tubo traqueal em volume de ar suficiente para determinar pressão limite de 25 cmH2O ou de “selo” para impedir vazamento de ar determina lesões mínimas da mucosa traqueal em contato com o balonete e sem diferença significante entre elas.

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Injuries of tracheal mucosa in contact with tracheal tube cuff is a function of cuff pressure and exposure time. This study aimed at analyzing injuries of tracheal mucosa in contact with tracheal tube cuff inflated to reach “seal” pressure or limit 25 cmH2O pressure, below critical 30 cmH2O, to prevent tracheal damage. METHODS: This study involved 16 dogs submitted to intravenous anesthesia and artificial ventilation. Dogs were randomly distributed into two experimental groups according to tracheal tube cuff pressure (Portex Blue Line, UK): Gseal (n = 8) cuff with minimum “seal” pressure to prevent air leakage during artificial ventilation; G25 (n=8) cuff inflated to 25 cmH2O. Cuff pressure was measured with a digital manometer at the beginning of the experiment (control) and 60, 120 and 180 minutes later. Animals were sacrificed and tracheal mucosa areas adjacent to the tracheal tube cuff were biopsed by scanning electronic microscopy (SEM). RESULTS: Mean cuff pressure was maintained between 24.8 and 25 cmH2O in G25 and between 11.9 and 12.5 cmH2O in Gseal. SEM changes were mild and not significantly different between groups (p > 0.30), with more severe injuries to tracheal areas in contact with the cuff as compared to areas adjacent or not to tracheal tube (p < 0.05). CONCLUSIONS: In dogs under our experimental conditions, tracheal tube cuff inflation to 25 cmH2O limit or to “seal” pressure to prevent air leakage has determined minor injuries to the tracheal mucosa in contact with tracheal tube cuff, without significant differences between groups.

JUSTIFICATIVA Y OBJETIVOS: Las lesiones de la mucosa traqueal en contacto con el balón del tubo traqueal son proporcionales a la presión ejercida por el balón y al tiempo de exposición. La finalidad fue estudiar las eventuales lesiones de la mucosa del segmento traqueal en contacto con el balón del tubo traqueal insuflado con volumen de aire suficiente para obtener presión de “sello” o con la presión limite de 25 cmH2O, abajo de la presión crítica de 30 cm de agua para producción de lesión de la mucosa traqueal. MÉTODO: Diez y seis canes fueron sometidos a anestesia venosa y ventilación artificial. Los canes fueron distribuidos aleatoriamente en dos grupos de acuerdo con la presión en el balón del tubo traqueal (Portex Blue-Line, Inglaterra): Gsello (n = 8) balón con presión mínima de “sello” para impedir vaciamiento de aire durante la respiración artificial; G25 (n = 8) balón insuflado hasta la obtención de la presión de 25 cmH2O. La medida de la presión del balón fue realizada por medio de manómetro digital en el inicio (control) y después de 60, 120 y 180 minutos. Después del sacrificio de los canes, fueron hechas biopsias en las áreas de la mucosa traqueal adyacentes al balón y al tubo traqueal para análisis de microscopio electrónico de barredura (MEV). RESULTADOS: La presión media del balón en G25 se mantuvo entre 24,8 y 25 cmH2O y en Gsello entre 11,9 y 12,5 cmH2O durante el experimento. Las alteraciones a la MEV fueron pequeñas y no significantemente diferentes en los grupos (p > 0,30), pero ocurrieron lesiones más intensas en las áreas de contacto de la mucosa traqueal con el balón del tubo traqueal, en los dos grupos, en relación a las áreas de la mucosa adyacentes o no al tubo traqueal (p < 0,05). CONCLUSIONES: En el can, en las condiciones experimentales empleadas, la insuflación del balón de tubo traqueal en un volumen de aire suficiente para determinar presión limite de 25 cmH2O o de “sello” para impedir vaciamiento de aire, determina lesiones mínimas de la mucosa traqueal en contacto con el balón y sin diferencia significante entre ellas.

OBJETIVO: Observar os efeitos da aplicação tópica de 5-fluorouracil (5-FU) sobre o epitélio corneano íntegro. MÉTODOS: Foram utilizados 10 coelhos albinos (14 olhos), divididos em: grupo controle (GC), 4 olhos nos quais não se administraram drogas, grupo 1 (G1), 5 olhos que receberam 5-fluorouracil na concentração 1,25% e grupo 2 (G2), 5 olhos que receberam 5-fluorouracil na concentração de 2,5%. A droga foi instilada 4 vezes por dia, durante 7 dias, quando os animais foram sacrificados, os olhos removidos, separando-se a córnea que foi preparada de modo convencional para estudo em microscópico eletrônico de varredura. RESULTADOS: GC: observaram-se células de formato hexagonal, claras, escuras e intermediárias, compondo o epitélio corneano de coelhos. Presença de numerosas microplicas, principalmente nas células claras. Cada célula possui cerca de 1 a 3 criptas. Nos animais do G1, observou-se maior número de células escuras, regiões com diminuição no número de criptas; alterações da superfície celular, protusão na região do núcleo e descamação de células epiteliais. Os do G2 tiveram aumento de microprojeções na superfície celular, modificações nas junções intercelulares até separação de células adjacentes; diminuição do número e variabilidade no tamanho das criptas. As alterações mais freqüentes ocorreram nas células da periferia da córnea. CONCLUSÃO: O 5-fluorouracil teve efeitos deletérios no epitélio íntegro corneano de coelhos. As alterações observadas foram mais importantes nos animais que receberam a droga mais concentrada (G2) e mais freqüentes na periferia da córnea.

PURPOSE: To assess the influence of the antiproliferative agent (5-FU) on the intact rabbit corneal epithelium. METHODS: 10 rabbits (14 eyes),were divided into: control group (CG), 4 eyes without drug administration; G1, 5 eyes underwent treatment with topical 12.5 mg/ml 5-fluorouracil and G2, 5 eyes received 5-fluorouracil in the concentration of 25 mg/ml. Topical 5-fluorouracil was administered four times daily for 7 days. Then the animals were sacrificed, the cornea was removed and fixed in 2% glutaraldehyde solution and the corneal specimens were prepared for scanning electron microscopy (SEM). RESULTS: CG: the corneal surface in normal rabbits are composed of characteristic flat polygonal cell arranged in a mosaic pattern, in which light, dark and intermediate cells were distinguishable. Light cells have the most numerous microplicae. The crypts were randomly distributed over the surface, one to three were founded on each cell. G1: dark cells were present in a higher number than white cells, with a tower number of crypts, surface alterations, exposing the nucleus and desquamative cells. G2: increase of microprojections, disrupted attachments with adjacent cells, decrease in number and variability of crypt size. These alterations appeared mainly at the peripheral cornea. CONCLUSION: 5-fluorouracil caused discernible changes in the intact rabbit cornea. These changes were more evident in eyes wich received the drug at a higher concentration, and appeared mainly at the peripheral cornea.

OBJETIVO: Analisar os efeitos da ingestão crônica de álcool sobre o nervo óptico em um modelo murino adulto. MÉTODOS: Doze ratos machos da raça Wistar, de 30 dias de idade, foram divididos por sorteio em 2 grupos experimentais: "tratado" (TG), com 8 animais, alimentados com ração-padrão para roedores de laboratório e uma mistura de água de torneira e etanol ad libitum; "controle" (CG), com 4 animais, alimentados com a mesma ração e água de torneira pura ad libitum. Após 40 semanas todos os ratos foram sacrificados, sendo os nervos ópticos de ambos os olhos preparados para microscopia óptica e eletrônica. A área de secção transversal de cada nervo a aumento de 500´, assim como número de fibras axonais dentro de 5 campos aleatoriamente selecionados a aumento de 2000´ foram medidos com auxílio de digitalizador de imagens acoplado ao microscópio óptico. Foram realizadas fotomicrografias de 10 campos aleatoriamente selecionados de cada nervo (5 centrais e 5 periféricos) a aumento de 4200´ em microscópio eletrônico de transmissão. RESULTADOS: A análise morfométrica não mostrou diferenças estatisticamente significativas entre os 2 grupos estudados. Em contraste com o CG, o exame ultra-estrutural dos nervos ópticos do TG mostrou um intenso desarranjo das bainhas de mielina, que se tornaram espessadas, com separação de suas lamelas, apresentando, por vezes, degenerações interlamelares elétron-densas, além da presença de muitas organelas degeneradas. CONCLUSÃO: Os achados desse estudo mostram alterações ultra-estruturais no nervo óptico de ratos adultos após ingestão crônica de álcool, sem modificações morfométricas significativas.

PURPOSE: To analyze the effects of chronic ethanol intake on the optic nerve in an adult rat model. METHODS: Twelve male, 30-day-old Wistar rats were randomly divided into 2 experimental groups: "treated" (TG), with 8 animals, fed standard laboratory rodent chow and a mixture of tap water and ethanol ad libitum; and "control" (CG), with 4 animals, fed the same chow and pure tap water ad libitum. After 40 weeks all rats were sacrificed, having their optic nerves prepared for both licht and electron microscopy. The cross-sectional area of each nerve, at a magnification of ´500, as well as the number of axons within 5 randomized field areas, at a magnification of ´2000, were measured by using an image digitizer. Randomized sampling was made for taking 10 photomicrographs of each nerve (5 central and 5 peripheral) at a magnification of ´4200 in a transmission electron microscope. RESULTS: Morphometric analysis showed no significant differences between both groups. In contrast with CG, the ultrastructural examination of TG optic nerves showed severe disarrangement of myelin sheaths, which became thicker, with separation of their lamellae, presenting sometimes electron-dense degenerations between them, and also many degenerated organellae. CONCLUSION: Our findings show ultrastructural alterations in the optic nerve of adult rats following chronic ethanol consumption, without morphometric changes.

Seis tipos de hemócitos circulantes foram caracterizados na hemolinfa de larvas de Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Pyralidae), através da microscopia eletrônica de transmissão e varredura: prohemócitos (PR), plasmatócitos (PL), granulócitos (GR), esferulócitos (ES), oenocitóides (OE) e vermiformes (VE). O PR foi o menor tipo celular; apresentando um núcleo grande, citoplasma com poucas organelas e superfície lisa e homogênea. O PL era polimórfico e abundante, com citoplasma rico em organelas e superfície celular com várias projeções citoplasmáticas. O GR era abundante, apresentando dois tipos de grânulos envoltos por membrana (denso e estruturado), glicogênio, gotas de lipídio e projeções citoplasmáticas filopodiais. O ES era uma célula grande, com citoplasma carregado de esférulas intracitoplasmáticas. O OE foi o maior tipo de hemócito encontrado, apresentando citoplasma grande, homogêneo e escassas organelas. O VE era discóide e apresentou grânulos elétrons-densos.

Six circulating hemocytes cell types from Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Pyralidae) larvae were identified by transmission and scanning electron microscope: prohemocytes (PR), plasmatocytes (PL) granulocytes (GR), spherulocytes (SP), oenocytoids (OE) and vermicytes (VE). The PR was the smallest cell type with a large nucleus, a cytoplasm with few organelles and a homogenous smooth surface. The PL was polymorphic and abundant, with a cytoplasm rich in organelles and a cellular surface with several cytoplasmic projections. The GR was abundant, showing two types of membrane-bounded granules (dense and structutered), glycogen, lipid droplets and a surface with philopodial projections. The SP was a large cell, with a cytoplasm full of intracytoplasmic spherules. The OE was the largest hemocyte type with a large and homogeneous cytoplasm and scarce organelles. The VE was discoid in shape and showed electron-dense granules.

Folhas adultas de Paepalanthus superbus mostram protuberâncias intercelulares, entre a parede periclinal interna das células epidérmicas e superfície de células parenquimáticas; depósitos semelhantes ocorrem na superfície das células parenquimáticas do mesofilo. Estas protuberâncias são mais proeminentes ao redor de células parenquimáticas, formando uma estrutura que lembra uma cápsula gelatinosa. Testes histoquímicos com vermelho de rutênio evidenciam sua natureza péctica, com inclusões lipídicas dispersas, detectadas por sudan IV e sudan black B. Ultra-estruturalmente as protuberâncias mostram matriz fibrilar permeada por estruturas fimbriadas e tubulares, com margem distinta formada por estrutura membranosa. Nossos resultados sugerem que estas protuberâncias são derivadas de atividade secretora, sendo formadas após o desenvolvimento dos espaços intercelulares. Em P. superbus esta estrutura pode representar uma especialização da parede celular, relacionada com adesão e mecanismos de transporte entre células.

Mature leaves of Paepalanthus superbus exhibit intercellular protuberances between the inner periclinal walls of the epidermal and the parenchyma cells surface, as well as on the surface of the parenchyma mesophyll cells. These structures are mostly prominent around the parenchyma cells, forming a gel capsule-like structure. Histochemical tests with ruthenium red indicate the pectic nature of the intercellular deposits, with scattered lipidic inclusions as revealed by sudan IV and sudan black B. Ultrastructural analyses show a fibrillar matrix with scattered fimbriate and tubular structures, and a distinct margin delimited by a dense membrane-like structure. Our results suggest that the protuberances are derived from secretory activity, and are formed after the development of the intercellular spaces. For P. superbus this structure may represent an important cell wall specialisation, related with the adhesion and transport mechanisms between cells.

Intestine samples of Bufo sp. tadpoles with parasitism confirmed for Giardia agilis were studied by transmission electron microscopy. The G. agilis trophozoites were long and thin. The plasma membrane was sometimes undulated and the cytoplasm, adjacent to the dorsal and ventral regions, showed numerous vacuoles. The two nuclei presented prominent nucleoli. The cytoplasm was electron-dense with free ribosomes, glycogen and rough endoplasmic reticulum-like structures. Polyhedral inclusions were observed in the cytoplasm and outside the protozoan; some of these inclusions exhibited membrane disruption. The flagella ultrastructure is typical, with the caudal pair accompanied by the funis. Next to the anterior pair, osmiophilic material was noticed. The ventro-lateral flange was short and thick, supported by the marginal plates that penetrated into its distal extremity; only its distal portion had adjacent osmiophilic filament. The G. agilis trophozoites showed the general subcellular feature of the genus. However, the ventro-lateral flange ultrastructure was an intermediate type between G. muris and G. duodenalis.

The three-dimensional characteristics between the epithelium-connective tissue of palatine mucosa of opossum were demonstrated using NaOH method. The tissues were carefully removed and fixed in modified Karnovsky solution for 12 h at 4ºC. Then, the specimens were prepared for scanning electron microscope. The results revealed that the surface of hard palatine mucosa presents stratified squamous keratinized epithelium and several transverse palatine plicae. In the anterior region, some elongated or pointed epithelial protrusions were noted. The lamina propria showed numerous connective tissue papillae disposed in parallel ridges. At high magnification, the thick bundles of collagen fibers were observed.

Las características tridimensionales del tejido conectivo epitelial de la mucosa del paladar duro fueron estudiadas usando el método de NaOH. Los tejidos fueron cuidadosamente removidos y fijados en solución de Karnovsky modificado por 12 h a 4ºC. Luego, los especímenes fueron preparados para microscopía electrónica de barrido. Los resultados revelaron que la superficie de la mucosa del paladar duro presenta epitelio escamoso estratificado queratinizado y varios pliegues palatinos transversos. En la región anterior, se observaron algunas protrusiones epiteliales alargadas o punteadas. La lámina propia mostró numerosas papilas de tejido conectivo en froma de elevaciones paralelas. A mayor aumento, se observaron gruesos haces de fibras colágenas

Throphozoites of Giardia duodenalis group obtained from fragments or scratched of hamster's mucosa were examined by transission electron microscopy. The fine structure of the trophozoites are presented and comapred with those described for other animals. Some of the trophozoites present the cytoplasm full of glycogen, rough endoplasmic reticulum-like structures and homogeneous inclusions not enclosed by membranes, recognized as lipid drops, which had not been observed in Giardia from other animals. The adhesive disk is composed of a layer of microtubules, from which fibrous ribbons extend into the cytoplasm; these ribbons are linked by layer of crossbridge filaments that shows an intermediary dense band, described for the first time in this paper. The authors regard this band as the result of the cross-bridge filaments slinding in the medium region between adjacent fibrous ribbons, and suggest a contractile activity for them. The role of the adhesive disk on the trophozoite mechanism of attachment to host mucosa is also discussed.

Neste trabalho foi analisada, através de Microscopia Eletrônica de Transmissão, a morfologia de trofozoitos de Giardia muris obtidos de hamsters, ratos peridomiciliares e camundongos, bem como de trofozoitos de Giardia duodenalis obtidos de hamsters e ratos peridomiciliares. Basicamente a ultraestrutura dos trofozoitos estudados foi semelhante. Foram observadas, no entanto, diferenças na morfologia da franja ventro-lateral dos trofozoitos de Giardia muris quando comparados com os de Giardia duodenalis, diferenças estas relacionadas ao tamanho, arranjo das lâminas marginais e presença de lamela osmiofílica.

Trophozoites of the Giardia muris group from hamsters, domestic rats and mice and of the Giardia duodenalis group from hamsters and domestic rats were examined by transmission electron microscopy. The basic ultrastructure of the trophozoites was similar. Differences were shown in the morphology of the ventrolateral flange of the trophozoites of Giardia muris and Giardia duodenalis groups. Marginal plates are less developed in the species of the Giardia duodenalis group. In this group, the distal extremity of the lateral flange is short and thick and the marginal plate does not penetrate into the distal extremity of the flange. In the Giardia muris group, the ventro-lateral flange is well developed and narrow and the marginal plate penetrates the distal extremity of the flange. The osmiophilic lamella, which accompanies the dorsal surface of the marginal plate is seen only in the Giardia muris group.